Das Hi Yield^® Large Plasmid DNA Mini Kit (10-50 kb) wurde für Plasmid-und Cosmid-DNA-Aufreinigung von 1-4 ml Bakterienkultur konzipiert und für die Isolierung von 10-50 kb Plasmid-DNA optimiert.

Das Hi Yield^® Large Plasmid DNA Mini Kit verwendet ein modifiziertes Verfahren mit alkalischer Lyse und RNase-Behandlung. In Gegenwart von chaotropen Salz bindet die Plasmid-DNA an die Glasfasermatrix der Spin-Säule. Verunreinigungen werden durch einen Waschpuffer (enthält Ethanol) entfernt und die gereinigte Plasmid-DNA wird durch einen Elutionspuffer, TE oder Wasser eluiert. Eine DNA-Extraktion mittels Phenol- oder Alkoholfällung ist nicht erforderlich.

Typische Ausbeutemengen sind 20-30 ug für high-copy Plasmide oder 3-10 ug für low-copy Plasmide aus 4 ml Bakterienkultur.

Die gereinigte Plasmid-DNA kann für weitere Anwendungen, z.B. Restriktionsenzymverdau, Ligation, PCR und Sequenzierungsreaktionen eingesetzt werden.

Die gesamte Aufreinigung dauert nur 15 Minuten

Vorteile:

• Aufreinigung von 10-50 kb Plasmid-DNA dauert nur 15 Minuten!
• Hohe Ausbeute: bis zu 30 µg Plasmid-DNA oder Cosmid-DNA
• Probenvolumen: 1-4 ml der Bakterienzellen (10-50 kb Plasmid)
• Spin Columns: Glasfasermembran optimiert für Aufreinigung von großen Plasmid DNA Fragmenten
• Lagerung: bis zu 1 Jahr bei Raumtemperatur (15-25 °C)